埼臨技会誌　Vol

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臨床化学免疫血清AIA-900(FEIA法)導入に際し,外注検査(CLIA法)との比較検討を行った.BNPは赤血球中酵素(プロテアーゼ)による分解を受けやすい事が知られ,分解を阻止する対策として,外注検査には凍結血漿検体で提出しているが,凍結(‐20℃以下)をしても測定値の低下は免れないことが知られている.院内では凍結することなく測定するため,凍結前血漿と凍結LC-MS/MSを用いた尿中MNおよびNMNの濃度測定法の検討AIA‐９００を用いた院内BNP測定の検討67【はじめに】これまでに尿中MN分画は，カラムスイッチングHPLCによるポストカラム誘導体化法（従来法）を用いて測定していた．従来法は試薬数とその量が多く，膨大な分析時間を要していた．そこで，これらの問題を解消するため，LC-MS/MSを用いた尿中MN分画の測定法の検討を行った．【方法】検体に6mol/L HClを加え，沸騰水に入れて加水分解した．上清を分取し，内部標準溶液を加え，LC-MS/MSで測定した．LC-MS/MSシステムは島津製作所社製のトリプル四重極型LCMS-8060を使用した．分析カラムは島津GLC社製のShimpack GISS C18(2.1 mmI.D×100mmL，3μm)を用いた．移動相Aに20mmol/L酢酸アンモニウム水溶液，移動相Bにメタノール，流速は0.3mL/min.のリニアグラジエント，カラム温度は25℃，試料注入量は0.3μLとした．質量分析条件はエレクトロスプレーイオン(ESI)の多重モニタリング(MRM)にて定量した.【はじめに】血中BNP値は心不全の診断・治療において,重要な指標となる検査項目である.当院では年間約4000件の依頼があるが,外注検査に委託していたため,その日のうちに結果を知ることが出来ない状況であった.全自動エンザイムイムノアッセイ装置AIA-900(東ソー社)を導入することによって院内で測定を行い,迅速に報告することが可能となった.後血漿の測定値の比較検討も行った.【対象】2018年3月14日から3月28日で外注BNPの依頼があった39件【方法】EDTA-2Na入り採血管に採取し,遠心分離した血漿を凍結前【結果】0.01～10mg/Lの濃度範囲での直線性は、相対誤差でMNは-3.3～+12.2 %，NMNは-9.2～+5.9 %であった．測定内及び測定間の精度は，測定内においてMNはCV%=0.0～4.5，RE%=-4.7～+1.8，NMNはCV%=0.0～6.9，RE%=+0.9～+10.3，測定間においてMNはCV%=0.0～3.3，RE%=-3.3～+1.8，NMNはCV%=0.0～2.5，RE%=+0.9～+9.0であった．10検体の確認でマトリックス効果は認められなかった．従来法との相関は，MNはy=1.000x+0.004，r=0.994，NMNはy=1.014x+0.017，r=0.992と良好であった．【まとめ】測定法の検討の結果，直線性，再現性，及び相関において良好な結果が得られた．またLC-MS/MS法に変更することにより，試薬使用量の削減と分析時間の短縮が可能となり、測定法の妥当性と有用性が確認された．連絡先：049（232）0087として測定.その後凍結(-30℃)で保存し,室温(約22℃)で解凍したものを凍結後として測定.【結果】外注検査とAIA-900(血漿凍結前)にy=0.904599x-10.169726 r=0.9995(p<0.0001)の良好な相関関係が見られ,外注検査とAIA-900(血漿凍結後)にy=1.057098x-8.656133r=0.9974(p<0.0001)の良好な相関関係が見られた.また,凍結後のBNP値は凍結前よりも約10％低下していた.【まとめ】試薬添付文書にFEIA法とRIA法との相関性が良好と記載されているが,今回の検討でFEIA法とCLIA法との相関性も良好であるということが分かった.【結語】院内BNPは今までの外注BNPよりも約10％値が高いという事を臨床に伝え,前回値と比較する際に考慮していただくこととし,AIA-900でのBNP測定を開始した.　　　　　　　　　　連絡先：048（474）7211内線451◎水村 千恵1）、江尻 昂永、村上 朋輝、難波 わさ、木戸 誠二郎◎水村 千恵1)、江尻 昂永、村上 朋輝、難波 わさ、木戸 誠二郎株式会社 ビー・エム・エル総合研究所1)株式会社 ビー・エム・エル総合研究所1）◎鳥村 亮1）、緒方 久江1）、野本 陽子1）、串田 なつき1）、濱野 拓也1）、坂本 のぞみ1）、清水 則明1）、高山 好弘2）◎鳥村 亮1)、緒方 久江1)、野本 陽子1)、串田 なつき1)、濱野 拓也1)、坂本 のぞみ1)、清水 則明1)、高山 好弘2)戸田中央医科グループ 新座志木中央総合病院1)、TMG本部 臨床検査部2)戸田中央医科グループ 新座志木中央総合病院1）、TMG 本部 臨床検査部2）EntryNo. 51EntryNo. 32LC-MS/MSを用いた尿中MNおよびNMNの濃度測定法の検討AIA‐９００を用いた院内BNP測定の検討化-5（第1会場　10：08～10：36）免-1（第1会場　10：37～11：04）